植物葉綠素測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)步驟

　　植物葉綠素測(cè)定儀是用來(lái)測(cè)量葉綠素含量的儀器，可以即時(shí)測(cè)量植物的葉綠素相對(duì)含量（單位SPAD）或“綠色程度"從而可以了解植物真實(shí)的硝基需求量并且?guī)椭私馔寥老趸娜狈Τ潭然蚴欠襁^(guò)多地施加了氮肥。您可以通過(guò)這種儀器來(lái)增加氮肥的利用率，并可保護(hù)環(huán)境。下面為大家介紹下植物葉綠素測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1.取新鮮植物葉片（或其它綠色組織）或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎（去掉中脈），混勻。

　　2.稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2～3ml95%乙醇，研成均漿，再加乙醇10ml，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。

　　3.取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤(rùn)，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，然后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?/span>

　　4.用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。然后用乙醇定容至25ml，搖勻。

　　5.把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白，在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。

　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總?cè)~綠素的濃度。然后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量：

　　葉綠素的含量（mg/g）=[葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重（或干重）。