酶聯免疫分析儀中的光電比色計的特殊要求

　　酶聯免疫分析儀即酶聯免疫檢測儀。是酶聯免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動兩大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶聯免疫分析儀中的光電比色計有特殊要求。

　　1、將標準品和樣品對應的微孔編號，每個標準品和樣品做雙孔平行，并記錄標準品和樣品的位置。

　　2、在標準品孔中加入50µl各標準品溶液，酶標儀在各樣品孔中加入50µl樣品溶液。

　　3、在所有孔中加入50µl的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻，25℃環境中避光反應30分鐘。

　　4、小心揭開蓋板膜，甩干孔中液體，用稀釋好的洗滌液（250μl/孔）充分洗滌微孔板3次，在吸水紙上拍干（拍干后未清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。

　　5、酶聯免疫分析儀在所有孔中加入100µl的酶標二抗，酶標儀用蓋板膜封板，輕輕振蕩混勻，25℃環境中避光反應30分鐘。取出酶標板，按步驟4洗板5次。

　　6、洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl底物液A，再加50µl底物液B，輕微晃動反應板使之混勻，25℃環境避光顯色15分鐘(在顏色淺的情況下可適當延長反應時間，但總顯色時間不要超過30分鐘)。

　　7、每孔中加入50µl終止液，輕輕晃動使之混勻，在450nm（建議使用雙波長450/630nm）下檢測吸光度，結果在5分鐘內讀取。